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Chinese Translation Vol 10, Issue 7

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新发现传染性疾病Volume 10, Number 7—July 2004的译文及摘要

P1213咽漱液和唾液中冠状病毒检测在SARS早期诊断中的应用

作者:Wei-Kung Wang,† Shey-Ying Chen,1 I-Jung Liu等

目前认为引起严重的急性呼吸道窘迫综合征(SARS)的冠状病毒--SARS-CoV系通过飞沫传播,至于口腔飞沫中SARS-CoV 的载量如何,人们却少有了解,为此,本文作者检测了17例SARS临床可疑病例的口腔标本,包括咽漱液和唾液。研究结果发现:在所有标本中,均检测到大量 的SARS-CoV,咽漱液和唾液SARS-CoV病毒载量分别为9.58*10 2~5.93*10 6拷贝/毫升和7.08*103~6.38*10 8拷贝/毫升。本实验结果支持了SARS病原经飞沫传播的说法,而且免疫荧光实验还证实了SARS-CoV在病人 咽漱液的脱落上皮细胞内复制的现象,这提示开发传统抗原检测实验的可能性,而且在四个发病后4天、肺部病灶尚未出现的SARS临床可疑病例中,该检测就有 较高的阳性检出率,提示咽漱液和唾液标本应该包括在SARS病例诊断标本的采集指南中。

Figure 1.

图2. 间接免疫荧光法检测SARS临床可疑病例咽漱液上皮细胞中的相关冠状病毒(SARS-CoV)的实验结果。A和B为接种SARS-CoV的Vero E6细胞先与用重组SARS-CoV核膜蛋白免疫前后兔血清孵育、再用荧光素标记的羊抗兔Ig G进行荧光检测的实验结果;E为健康对照人群标本与免疫后兔血清孵育、再用荧光标记的第二抗体检测的结果;C 、D和F、G分别是两例SARS确证病例(ID17和ID11)与免疫前后兔血清孵育、再用荧光标记的第二抗体检测的结果的检测结果;H为G在光学显微镜下的表现。

P1227重组病毒与早期的全球化HIV-1流行

作者:Marcia L. Kalish, Kenneth E. Robbins, Danuta Pieniazek 等

中部非洲是全球HIV-1流行的中心。了解刚果民主共和国(以往称为扎伊尔)早期的HIV疫情,有助于了解全球HIV疫情的发生发展过 程,促进疫苗的开发和干预措施的实施。采用酶联免疫分析实验方法(ELISA),本文作者检测了3988份采集于刚果民主共和国二十世纪八十年代中叶的血 清样本,初筛阳性的标本再用免疫印迹法加以确认,同时进一步对其gag p17, env C2V3C3, 和/或gp41进行多聚酶链反应(PCR扩增)、DNA序列测定和基因分析。研究结果表明:在待测标本中发现了代表M组HIV-1各个亚型的所有基因片 段,而且还有些甚至根据目前的型别划分原则尚无法将其归类。从这2至3个较短的基因片段来看,37%的病毒株代表了重组病毒、多重感染或两者兼而有之,该 结果提示,如果将所有这些病毒的全基因加以扩增的话,那将得到马赛克样的全基因组。据此,本文作者推测在二十世纪八十年代初的中非,艾滋病病毒感染的疫情 就已经达到相当的水平,而且一些重组病毒很有可能已经存在,并随后向世界其他地区播散。

Figure 1.

图1  二十世纪八十年代中叶扎伊尔的56株HIV病毒、1997年刚果民主共和国的197株HIV病毒与特定亚型参照株比较得出的系统发生树。

Figure 2.

图2 各种HIV-1亚型病毒和重组病毒的分布情况。本饼图系本研究66个病毒株经过2~3个基因片段的扩增、测序和基因分析等实验结果。

P1318呼吸道合胞病毒病的临床严重程度与人麦塔肺病毒感染之间的关系

作者:Isaac Lazar,* Carla Weibel,* James Dziura 等

在美国,每年有10万名婴幼儿因呼吸道合胞病毒感染所致的支气管炎而需要住院治疗。虽然重症呼吸道合胞病毒病已有一些明确的危险因素,如早产、支气管肺部发育不良等,但是目前仍有一些重症病例发生于貌似健康的儿童中,究其发病机理,目前尚不清楚。

2001年van den Hoogen 等报告从呼吸道疾患儿体内分离到新型副粘病毒即人麦塔肺病毒(HMPV,又称人间质肺炎病毒),随后世界各地陆续可见类似报道。该病呈明显的季节分布,以 冬春季为甚。由于人麦塔肺病毒(HMPV)与呼吸道合胞病毒的流行存在重叠,人们认为两种病毒的合并感染有可能导致重症RSV病患的出现。 Greensill 等报道70% 因感染呼吸道合胞病毒、入住利物浦儿科特护病房(PICU)的患儿同时合并感染了HMPV。本文旨在通过了解轻型和重症呼吸道合胞病毒感染患儿合并感染 HPMV的几率,探讨呼吸道合胞病毒的严重程度与同时感染HMPV是否存在关联。疾病的严重程度根据是否需要特种护理以及临床严重程度的评分加以判定。

本文作者于2001年11月1日至2002年10月31日在Yale-New Haven 医院收集了直接免疫荧光实验(DFA)检测RSV抗体呈阳性的所有患儿的呼吸道分泌物标本,并用DFA方法排除副粘病毒1~3型、甲型和乙型流感病毒以及 腺病毒等感染。本研究包括了在研究期间收住儿科特护病房(PICU)的所有病例,而且将每个收住PICU的重症病例与一个近期诊断的(相隔2天内)的轻型 病例配对。病例临床病情严重程度的评估采用Martinello等的方法,采集的标本采用de Leys R等的方法进行RNA提取和针对RSV L基因和HMPV F基因的扩增。根据现有的报道,我们预计本次研究重症RSV感染病例—入住PICU的患儿,其HMPV的感染率应接近70%,而轻型病例的HMPV阳性率 应为6.4%左右,与本文非RSV感染呼吸道患儿平均HMPV感染情况相似。然而事实并非如此。

在本研究期间,共征集到23对研究对象,包括23例呼吸道合胞病毒直接荧光实验阳性、入住PICU 的病例和23例呼吸道合胞病毒直接荧光实验阳性的轻型病例。他们的HMPV RNA  RT-PCR检测结果显示,无一例入住PICU 的RSV感染重症病例HMPV RNA阳性,也无一例轻型RSV感染的病例HMPV RNA阳性,本文研究结果显示,在所观察的病例中,无论是轻型或是重症RSV感染病例均未发现合并感染HMPV。PICU 重症组和轻型病例之间唯一有统计学显著性意义的因素包括病例的年龄(中位数为7周、54周);收入住院治疗的比例(23/23、8/23);临床病情严重程度评分(中位数分别为5 、 1)。

为何本文的调查与Greensill等的研究出现截然不同的结果。本文作者认为本文所采用筛查方法不足于解释两个调查研究之间的结果差 异。首先本文的调查与Greensill等的研究两者采用的均是RT-PCR方法;再者本文作者坚信所使用方法的敏感性和特异性,因为他们即往也对呼吸道 样本作过HPMV感染情况的调查,结果与其他调查报道的结果类似,HMPV RT-PCR的阳性率为8.1%;而且为了确证本研究所采用RT-PCR的有效性,本文作者对该46个研究对象也进行RSV RNA RT-PCR检测,结果表明:其中 44例RSV RNA呈阳性反应,阳性率为95.7%。 据此,本文作者认为可能是英国利物浦地区HPMV的流传率较高,导致了Greensill等观察到RSV 和HPMV合并感染率较高的现象,虽然目前尚无证据支持这点假设。同时,也有其他类似的调查报道HPMV 和RSV合并感染相当少见。

至于重症RSV感染的致病机理应该是多方面的,仅从宿主方面寻求原因显然难以完全对其加以解释,其他的相关因素可能还包括患儿从母体获得的免疫力、先天性免疫力、病毒因素、病毒的基因型别和环境因素等,而HPMV合并感染很有可能在其中并不起主要作用。

福建省疾病预防控制中心  颜苹苹译

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