爱荷华州1994及1996年白尾鹿血清查菲埃里希体抗体调查
Linda Mueller-Anneling , Mary J.Gilchrist ,Peter S.Throne 著
Chinese Translations - 中文译本 > Volume 6 - 第6卷
在1994年及1996年调查的2277头白尾鹿中,血清埃里希体抗体阳性率分别为12.5%和13.9%。1994至1996年,血清抗体阳性的鹿总数估计增加到54701头(增加了28%)。鹿数量的日益增加和蜱分布区域的逐渐扩大可能会增加人单核细胞埃里希体病的危险性。
人单核细胞埃里希体病(Human monocytic ehrlichiosis, HME)是一种不久前刚被人类认识的疾病,由查菲埃里希体(Ehrlichia chaffeensis) —— 一种类似立克次体、革兰染色阴性的多形性细菌所引起。HME引起的疾病轻可类似于感冒,重可危及生命。该病潜伏期长、症状不明显,常常难以诊断。确定病原体及传播媒介的生态龛对于埃里希体病和该病的职业危险及环境危险性的描述都很重要。爱荷华州南部的县与地方性HME流行地区相毗邻,该病原体的保存宿主白尾鹿(Odocoileus virginianus)在爱荷华也很普遍,传播媒介是美洲钝眼蜱(Amblyomma americanum)。
尽管人可能成为幼蜱及成蜱的宿主,但不是其最适合宿主,因此人是HME偶然的终宿主。人传给人的例子尚未见报。最容易感染埃里希体的是蜱高暴露人群,包括猎人、农民、徒步旅行者、野营者、林场工人以及公园管理员。为了解查菲埃里希体在爱荷华州的流行情况及地理分布,我们检测了1994年和1996年在该州各县收集到的白尾鹿血标本。选择白尾鹿作为HME的哨兵动物是因为:1)非特异性症状造成轻症状者及亚临床病例的诊断困难;2)鹿是美洲钝眼蜱的初宿主;3)鹿的活动范围小(仅4 Km2)使其地理分布能快速确定;4)爱荷华州的猎人愿意提供鹿血标本。而且在所有的99个县对蜱进行收集、分类及聚合酶链反应(PCR)分析是不可行的,如果对蜱进行检测,要得到一个有意义的阳性数字,就需要分析极为大量的蜱。反过来,一头鹿在一生中可能被上千只蜱叮咬,这其中只要有一次叮咬引起感染就会导致血清抗体阳性。
研究方法
在1994年和1996年随机地分别选择执证猎鹿者2500名和2000名,每人分给一个袋子,内装一份研究说明、两张Nobuto血滤纸条(日本东京Toyo Roshi Kaisha公司产)和一个预付邮资的返回信封。告诉猎人们收集一个鹿的血标本在滤纸条上,干后装入可封口的袋子寄回,同时在地图上标明捕获鹿的县。将收有0.1ml 全血标本的Nobuto滤纸条浸在pH7.4的磷酸盐缓冲液(PBS)中,4oC放置3小时洗脱,洗下的标本-70oC保存待测。用感染有查菲埃里希体的狗恶性巨噬细胞包被12孔的Teflon包被的载玻片,所有血标本经1:64稀释后用免疫荧光抗体法(IFA)检测,荧光强度在一个“+”及以上判为阳性。
用二项分布比例齐性的卡方检验来计算全州及各个地区阳性率差异的统计学意义,用二项分布比例趋势的卡方检验来说明南北趋势的统计意义。所有检验都用EpiInfo软件6.04版进行,α值取0.05。
在发给猎人们的4500份血标本袋中,共收回2881份,其中2877份可用(总回收率为64%,1994年为71%,1996年为55%)。1994年的标本来自爱荷华州所有的99个县(平均每县17.9份标本[2~82]),1996年的标本来自99个县中的97个(平均每县11.2份[0~82])。为方便分析流行状况的地理趋势,我们将爱荷华地图按纬度分成三排。
爱荷华州鹿的数量在不断增加,为估计全州范围的阳性率,我们从爱荷华州自然资源部门(DNR)获得各县的鹿总数的估计值。自1994到1996年,爱荷华州鹿的总数增加了14%,换句话说,增加了45000头。1994年鹿群分布是北部 23.3%,南部 43.5%;而1996年时,北部 27.0%,南部 40.3%。尽管南部鹿群密度要高于北部,但鹿数量的增长主要发生在北部地区。这种增长也导致了这两年标本的南北分布的地区差异。本课题的采样量占鹿群总量的百分率分别为:1994年约0.55%,1996年约0.30%。各个地区1994年的抽样率和1996年的抽样率之比几乎没有差别(北部地区为1.84,中部地区为1.84,南部地区为1.82)。1994年全州范围的 阳性率为12.5%,1996年增加到13.9%。地图显示血清阳性率从北向南呈现增加的趋势,最南部的几个县有着最高的阳性率。在1994年的调查中,北部县区总共只发现6头抗体阳性的鹿,1996年则一只也没有。北部发现的这6头阳性的鹿中,有5头是在密西西比河附近、爱荷华东部边界的县区。在中部地区,只有一个县的阳性率超过24%,而它的标本量只有4头。南部地区的结果则截然不同:1996年南部31个县中就有25个查到抗体阳性的鹿,其中有20个县的阳性率超过25%。
计算血清抗体的阳性率、比值比(OR)、估计抗体阳性的鹿数量来确定从北向南逐渐增长之地区趋势的强度。在这两年都发现这个趋势非常显著(1999年,χ2=183,p<0.00001;1996年,χ2=173,p<0.00001)。分析这两年全州以及各地区的阳性率资料表明:阳性率的增长只在南部地区较为明显(χ2= 5.3,p=0.021)。资料表明1994年到1996年全州的阳性率增加了28.0%,绝大部分增长发生在南部地区。
结论
将爱荷华周分成三个地区来评价流行情况,出现了从北向南逐渐增加的趋势。这个信息可将职业与公共卫生的防范措施导向HME危险性最高的地区。南部地区,1/4至1/3的鹿血清埃里希体抗体阳性。我们的资料显示爱荷华南部县区该病的传播媒介——蜱的存在,而且与HME的流行地区毗邻,所以HME的 可能性是存在的。这个繁茂的森林地区提供了鹿和蜱接触的理想条件。在东部边境的密西西比河谷地区及一些小河流域也发现了查菲抗体阳性的鹿。这些较原始的潮 湿的森林地区促进了查菲埃里希体向爱荷华北部和西部传播蔓延。中北部地区相对平坦,鹿群虽多,但无森林覆盖,也很少有美洲钝眼蜱,因此这些地区的鹿很少象 南部或沿河流森林地区的鹿那样有接触到美洲钝眼蜱的机会。我们的资料支持中北部地区是一个HME低发生地区的猜想。
本研究尚有几处局限:其一,从各县得来的鹿总量资料与我们的研究一样存在选择偏倚,因为很多资料是基于猎人杀死的鹿的数量统计得来。根据爱荷华自然资源部野生动物学家的看法,实际鹿的数量与我们估计的数量会有10%左右的差距。其二,一些县交回的标本数量十分有限,不过猎人总喜欢在鹿多的地方捕鹿。第三 ,IFA有较高的灵敏度,但特异性却不够;因此可能发生与非致病性埃里希体的交叉 反应,不过与犬埃里希体和尤氏埃里希体之类的交叉反应少,也未见有鹿感染这些埃里希体的报道。作为一种新出现的病原体,查菲埃里希体最近才被深入研究。尽 管在伊利诺斯州和密苏里州以及爱荷华南方的其他州有过HME的病例,但未有传播到爱荷华的报道。许多医生对莱姆病和洛基山斑疹热较为熟悉,却很少了解埃里希体病,也未将其列入鉴别诊断。